检验案例：警惕ELISA检测梅毒抗体中的假阴性

作为检验科的新人，上班两年来一直在检验科的各个科室进行轮转。最近在免疫轮科，承担梅毒艾滋定性组的检验任务。到这组工作前就知道，这组工作量的特点是标本多，杂事多，纠纷多。而最近的一次案例，让我对此有了切身的体会。

案例经过

周一医生下单，周二患者集体采血做检查，标本量众多，所以每个周二都让检验工作者如临大敌，这一周也不例外。经过紧张的工作之后，我终于把所有结果初步审核完毕，搭档林老师进行复审。在复审过程中，林老师提醒我「小俞，这两管血是一个人的，但是结果却怎么是一阴一阳？」 我一惊，怎么可能呢？仔细看了下，的确如此。相同的姓名，相同的采集时间，但是一个查的是梅艾全项，包括梅毒螺旋体抗体，艾滋病毒抗体和甲苯胺红不加热实验；另一张只是单独的梅毒螺旋体抗体检测。

会不会采错血了？这是我脑海里的第一个念头。通过化验单上的标本号，我迅速找到了这两份标本。二者血清的颜色一致，而采集时间也是相同的，并且血型相同，于是我初步否定了采错血的想法。

在这里有必要阐述一下我们的检测流程（如下图所示）。我们对梅毒检测采用反向检测流程。当标本来了之后，我们先做ELISA，如果 S/CO≥1，初步判定为阳性，挑出后用 TPPA 进行确认，同时做 TRUST 检测滴度。如果 TPPA 为阳性，报梅毒抗体阳性和 TRUST 滴度，如果 TPPA 为阴性，报梅毒抗体阴性。而 S/CO＜1，直接就按阴性标本发送结果。虽然，WB 才是梅毒螺旋体抗体的确认实验，但在临床工作中这项工作很难开展，而 TPPA 与确认实验符合率较高，并且临床操作性强，基本就当成确认实验来应用了。

图 1 为梅毒检验流程

通过查看原始实验数据，这份阳性的标本，S/CO 为 1.06，所以挑了出来做 TPPA，TPPA 为阳性，TRUST 为阴性，所以结果报为阳性。而那份报阴性的结果，S/CO 为 0.72，所以直接当成阴性标本了。这两个板的质控孔都在范围内。我把这两管血重新做了 TPPA 检测，最终结果均为阳性。如果不是林老师的复审，这个患者收到的就是截然相反的两种结果。和临床医生进行沟通后了解到，此患者为中年女性患者，丈夫曾有冶游史，近期确诊为梅毒。而她自己最近感觉身体略有不适，故来医院检查。出现这种情况，可能处于梅毒早期，告知患者过段时间再来复检。

经验教训

上述事情虽然得以解决，但是从中也暴露出我们工作中的一些不足之处：

首先，医生对检验项目不熟悉，开出了重复的检验项目，估计是一个新入职的医生，从而也说明我们和临床沟通不够，对新入职的医生应该加强培训，使他们尽快熟悉检验科的检验项目。

其次，LIS 系统的设置存在一定的欠缺，由于两份标本是两个不同的检验号，在 LIS 系统里可以同时接收，而众多的标本混在一起，使我没有发现这是同一个人。由于在LIS系统中设置的问题，单项梅毒阳性作为历史结果并不会通过红色提示阳性，而在梅艾全项检测中，阳性结果会醒目的标出。这次结果中，单项检测筛出是阳性，而全项中是阴性，所以我并没有发现。在后续的工作中，要与LIS管理员沟通，同一个人同一检验项目，如果差异较大，应该设置有醒目的提示，提醒工作人员注意。当然，我自己的疏忽也是导致此次事件的重要原因，要是没有其他老师的二次审核，我就发送了一个错误的报告。从中也说明二次审核的重要性，也提醒检验同行在工作中一定要按照规定，严格执行二次审核制度，这样可以减少很多工作中的失误。

再次，方法学方面，ELISA 检测灵敏度较高，相对于 TPPA 假阳性率会高一些。所以在实际工作中经常会出现 ELISA 阳性而 TPPA 确认是阴性的案例。但这次事件也暴露了 ELISA 也有一定的假阴性，在临界值附近的结果一定要特别注意。为了不再发生这样的漏检事件，我们做了以下实验：S/CO＞0.1，肉眼观察稍微有点颜色的都挑出进行TPPA检测，实践证明， S/CO 值为0.7 以上的偶尔会出现 TPPA 阳性，但是概率也是非常小，但 S/CO 小于 0.5 的没有出现 TPPA 阳性结果。当然也会根据每一个板的质控结果略微进行调整。说明书把临界 S/CO 值设定为 1，但我们根据科里的实际情况进行了调整。通过这次事件，也让我学到了一些书本中没有的知识，也对梅毒的检测有了更深刻的认识。

这个事件再一次提醒我工作时一定要一丝不苟，严格按照操作规程，保存好相关记录，以便在出现问题时进行查对和查找原因。

参考文献

[1]梅毒螺旋体免疫检验，全国临床检验操作规程第4版，2015：454-456.

[2]梅毒检验方法的比较与分析，中国医药指南，2016，14（15）：94.

编辑： 孙舒宁

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